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本制品是等温扩增实验的预混反应液，包含了反应缓冲液、Bst4.0 DNA/RNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等，使用时只需要加入引物、DNA模板或RNA模板即可进行高效的恒温扩增反应，是进行LAMP及RT-LAMP扩增反应的绝佳试剂。此外，本制品还可以用于其它恒温扩增实验，包括CPA、SMAP等。

本制品不包含任何其它辅助染料，在LAMP或RT-LAMP实验时可搭配OTG橙绿变色管(货号：MT2821)进行可视化变色反应。

• 关于矿物油的使用，在配制完LAMP反应体系后，可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部，以减少气溶胶的污染。
  
• 鉴于特殊的生产工艺，本制品不能进行浊度分析。
  
• 在用于其它恒温扩增反应时（如CPA、SMAP等），可参考如下策略进行使用，反应时间可能会需要调整。

以搭配OTG橙绿变色管为例，橙绿变色染料（OTG Dye）以冻干的形式预加在8联管盖上。在LAMP反应完毕后（在反应完毕前，务必不能将管盖上染料混入反应液中），将0.2mL EP管颠倒溶解OTG染料后。LAMP的反应产物将与OTG染料形成强烈的绿色肉眼可见变色反应（阳性），而未发生扩增的EP管为深橙色（阴性）。

• 配制反应体系：
  
  • 按下表向0.2mL EP反应管中加入各成分：
    

    成分	用量
    2×RNA/DNA LAMP Mix	10μL
    10×LAMP Primer Mix	2μL
    模板DNA/RNA	X μl
    ddH2O	至20μL

    • 10×LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4μM each、F3/B3 2μM each。
      
    • 首次实验LAMP Primer Mix分别采用1、1.5、2μL，以阴性不变色，阳性样品正常变色为标准，作为后续测试用量。
  • 全部试剂加入完毕后，轻弹EP管底部后，再盖上OTG橙绿变色管。
    
    • 盖上管盖后务必不能再剧烈混合与倒置，防止将管盖上的OTG染料溶解，一旦OTG染料混入反应液中会终止LAMP反应。
• LAMP扩增：反应体系配好后，置于60～68℃（首次实验采用65℃）进行反应20～45min。
  
  • 扩增良好的引物组合，通常25min即可变色，一般不超过45min，首次实验设置20、25、30、45min。
• 观察结果：将反应EP管倒置，并手腕轻甩，反应液浸泡EP管盖上的OTG染料，静置30s。再将EP反应管正置，并轻甩反应液到EP管底部，此时扩增样品将变为鲜艳肉眼可见绿色，而阴性未发生扩增的管将为深橙色。
  
  • 观察时共用尽可能不要共用配制反应空间，以防止污染操作台。